-
Minyak jojoba organik ditekan sejuk minyak pembawa biji jojoba untuk urutan penjagaan kulit
Konstituen utama minyak Jojoba semulajadi ialah Asid Palmitik, Asid Erusik, Asid Oleik, dan Asid Gadoleik. Minyak jojoba juga kaya dengan vitamin seperti Vitamin E dan Vitamin B kompleks.
Lilin tumbuhan cecair Loji Jojoba berwarna keemasan. Minyak herba Jojoba mempunyai aroma pedas yang khas dan merupakan tambahan pilihan kepada produk Penjagaan Diri seperti krim, solek, syampu, dan lain-lain. Minyak ubat herba Jojoba boleh terus disapu pada kulit untuk Selaran Matahari, Psoriasis, dan Jerawat. Minyak Jojoba tulen menggalakkan Pertumbuhan Rambut juga.
-
Minyak Pati Lavender Organik Tulen Asli untuk penjagaan kulit Aromaterapi
Kaedah Pengekstrakan atau Pemprosesan:Stim disuling
Bahagian Pengekstrakan Penyulingan: Bunga
Asal negara: China
Permohonan: Meresap/aromaterapi/urut
Jangka hayat: 3 tahun
Perkhidmatan tersuai: label dan kotak tersuai atau sebagai keperluan anda
Pensijilan:GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% Minyak Essential Oil Magnoliae Officimalis Organik Organik Asli Tulen Untuk Penjagaan Kulit
Wangian Hou Po serta-merta pahit dan pedas tajam kemudian dibuka secara beransur-ansur dengan rasa manis dan kemesraan yang mendalam.
Perkaitan Hou Po adalah dengan unsur Bumi dan Logam di mana kehangatan pahitnya bertindak kuat untuk menurunkan Qi dan kelembapan kering. Kerana kualiti ini, ia digunakan dalam perubatan Cina untuk melegakan genangan dan pengumpulan dalam saluran penghadaman serta batuk dan berdehit akibat kahak yang menghalang paru-paru.
Magnolia Officinials ialah pokok daun luruh yang berasal dari pergunungan dan lembah Sichuan, Hubei dan wilayah lain di China. Kulit kayu beraroma tinggi yang digunakan dalam perubatan tradisional Cina dilucutkan daripada batang, dahan dan akar Dikumpul pada bulan April hingga Jun. Kulitnya tebal, licin, berat dengan minyak, mempunyai warna keunguan di bahagian dalam dengan kilauan seperti kristal.
Pengamal boleh mempertimbangkan untuk menggabungkan Hou Po dengan minyak pati Qing Pi sebagai pujian utama dalam adunan yang bertujuan untuk memecahkan pengumpulan.
-
Minyak Rhizoma Macrocephalae Asli Pakej Tersuai OEM
Sebagai agen kemoterapi yang cekap, 5-fluorouracil (5-FU) digunakan secara meluas untuk rawatan tumor malignan di saluran gastrousus, kepala, leher, dada dan ovari. Dan 5-FU adalah ubat barisan pertama untuk kanser kolorektal di klinik. Mekanisme tindakan 5-FU adalah untuk menyekat transformasi asid nukleik urasil kepada asid nukleik timin dalam sel tumor, kemudian menjejaskan sintesis dan pembaikan DNA dan RNA untuk mencapai kesan sitotoksiknya (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Walau bagaimanapun, 5-FU juga menghasilkan cirit-birit yang disebabkan oleh kemoterapi (CID), salah satu tindak balas buruk yang paling biasa yang melanda ramai pesakit (Filho et al., 2016). Insiden cirit-birit pada pesakit yang dirawat dengan 5-FU adalah sehingga 50% -80%, yang secara serius menjejaskan kemajuan dan keberkesanan kemoterapi (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Oleh itu, adalah sangat penting untuk mencari terapi yang berkesan untuk CID teraruh 5-FU.
Pada masa ini, campur tangan bukan ubat dan campur tangan ubat telah diimport ke dalam rawatan klinikal CID. Campur tangan bukan ubat termasuk diet yang munasabah, dan tambahan dengan garam, gula dan nutrien lain. Dadah seperti loperamide dan octreotide biasanya digunakan dalam terapi anti-cirit-birit CID (Benson et al., 2004). Di samping itu, etnoperubatan juga diterima pakai untuk merawat CID dengan terapi unik mereka sendiri di pelbagai negara. Perubatan Tradisional Cina (TCM) adalah salah satu etnoperubatan tipikal yang telah diamalkan selama lebih daripada 2000 tahun di negara Asia Timur termasuk China, Jepun dan Korea (Qi et al., 2010). TCM berpendapat bahawa ubat kemoterapi akan mencetuskan penggunaan Qi, kekurangan limpa, ketidakharmonian perut dan kelembapan endofit, mengakibatkan disfungsi konduktif usus. Dalam teori TCM, strategi rawatan CID harus bergantung terutamanya pada penambahan Qi dan pengukuhan limpa (Wang et al., 1994).
Akar kering daripadaAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) danPanax ginsengCA Mey. (PG) adalah ubat herba tipikal dalam TCM dengan kesan yang sama untuk menambah Qi dan menguatkan limpa (Li et al., 2014). AM dan PG biasanya digunakan sebagai pasangan herba (bentuk keserasian herba Cina yang paling ringkas) dengan kesan menambah Qi dan menguatkan limpa untuk merawat cirit-birit. Sebagai contoh, AM dan PG telah didokumenkan dalam formula anti-cirit-birit klasik seperti Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang daripadaTaiping Huimin Heji Ju Fang(Dinasti Song, China) dan Bu Zhong Yi Qi Tang dariPi Wei Lun(Dinasti Yuan, China) (Rajah 1). Beberapa kajian terdahulu telah melaporkan bahawa ketiga-tiga formula mempunyai keupayaan untuk mengurangkan CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Di samping itu, kajian terdahulu kami menunjukkan bahawa Kapsul Shenzhu yang hanya mengandungi AM dan PG mempunyai potensi kesan ke atas rawatan cirit-birit, kolitis (sindrom xiexie), dan penyakit gastrousus lain (Feng et al., 2018). Walau bagaimanapun, tiada kajian telah membincangkan kesan dan mekanisme AM dan PG dalam merawat CID, sama ada secara gabungan atau bersendirian.
Kini mikrobiota usus dianggap sebagai faktor yang berpotensi dalam memahami mekanisme terapeutik TCM (Feng et al., 2019). Kajian moden menunjukkan bahawa mikrobiota usus memainkan peranan penting dalam mengekalkan homeostasis usus. Mikrobiota usus yang sihat menyumbang kepada perlindungan mukosa usus, metabolisme, homeostasis imun dan tindak balas, dan penindasan patogen (Thursby dan Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Mikrobiota usus yang tidak teratur menjejaskan fungsi fisiologi dan imun tubuh manusia secara langsung atau tidak langsung, mendorong tindak balas sampingan seperti cirit-birit (Patel et al., 2016; Zhao dan Shen, 2010). Penyelidikan telah menunjukkan bahawa 5-FU telah mengubah struktur mikrobiota usus dalam tikus cirit-birit (Li et al., 2017). Oleh itu, kesan AM dan PM pada cirit-birit yang disebabkan oleh 5-FU mungkin dimediasi oleh mikrobiota usus. Walau bagaimanapun, sama ada AM dan PG sahaja dan dalam kombinasi boleh menghalang cirit-birit yang disebabkan oleh 5-FU dengan memodulasi mikrobiota usus masih tidak diketahui.
Untuk menyiasat kesan anti-cirit-birit dan mekanisme asas AM dan PG, kami menggunakan 5-FU untuk mensimulasikan model cirit-birit pada tikus. Di sini, kami menumpukan pada kesan potensi pentadbiran tunggal dan gabungan (AP) bagiAtractylodes macrocephalaminyak pati (AMO) danPanax ginsengjumlah saponin (PGS), komponen aktif masing-masing diekstrak daripada AM dan PG, pada cirit-birit, patologi usus dan struktur mikrob selepas kemoterapi 5-FU.
-
100% Minyak Pati Eucommiae Foliuml Asli Asli Tulen Untuk Penjagaan Kulit
Eucommia ulmoides(EU) (biasa dipanggil "Du Zhong" dalam bahasa Cina) tergolong dalam keluarga Eucommiaceae, genus pokok kecil yang berasal dari China Tengah [1]. Tumbuhan ini ditanam secara meluas di China secara besar-besaran kerana kepentingan perubatannya. Kira-kira 112 sebatian telah diasingkan daripada EU yang termasuk lignan, iridoid, fenolik, steroid dan sebatian lain. Formula herba pelengkap tumbuhan ini (seperti teh yang lazat) telah menunjukkan beberapa sifat perubatan. Daun EU mempunyai aktiviti yang lebih tinggi berkaitan dengan korteks, bunga, dan buah [2,3]. Daun EU telah dilaporkan dapat meningkatkan kekuatan tulang dan otot badan [4], sehingga membawa kepada umur panjang dan menggalakkan kesuburan pada manusia [5]. Formula teh lazat yang diperbuat daripada daun EU dilaporkan dapat mengurangkan kegemukan dan meningkatkan metabolisme tenaga. Sebatian flavonoid (seperti rutin, asid klorogenik, asid ferulik, dan asid kafeik) telah dilaporkan mempamerkan aktiviti antioksidan dalam daun EU [6].
Walaupun terdapat literatur yang mencukupi mengenai sifat fitokimia EU, namun beberapa kajian wujud mengenai sifat farmakologi pelbagai sebatian yang diekstrak daripada kulit kayu, biji, batang dan daun EU. Kertas kajian ini akan menjelaskan maklumat terperinci mengenai sebatian berbeza yang diekstrak daripada pelbagai bahagian (kulit kayu, biji, batang, dan daun) EU dan penggunaan prospektif sebatian ini dalam sifat menggalakkan kesihatan dengan bukti saintifik dan dengan itu menyediakan bahan rujukan untuk permohonan EU.
-
Minyak Houttuynia Cordata Asli Tulen Minyak Houttuynia Cordata Minyak Lchthammolum
Di kebanyakan negara membangun, 70-95% penduduk bergantung pada ubat tradisional untuk penjagaan kesihatan primer dan daripada 85% orang ini menggunakan tumbuhan atau ekstraknya sebagai bahan aktif.[1] Pencarian sebatian aktif biologi baharu daripada tumbuhan biasanya bergantung kepada maklumat etnik dan rakyat tertentu yang diperoleh daripada pengamal tempatan dan masih dianggap sebagai sumber penting untuk penemuan dadah. Di India, kira-kira 2000 ubat berasal dari tumbuhan.[2] Memandangkan minat yang meluas untuk menggunakan tumbuhan ubatan, tinjauan sekarang mengenaiHouttuynia cordataThunb. menyediakan maklumat terkini dengan merujuk kepada kajian botani, komersial, etnofarmakologi, fitokimia dan farmakologi yang terdapat dalam kesusasteraan.H. cordataThunb. milik keluargaSaururaceaedan biasa dikenali sebagai ekor cicak cina. Ia adalah herba saka dengan rizom stoloniferous yang mempunyai dua kemotip yang berbeza.[3,4] Chemotype Cina spesies ditemui dalam keadaan liar dan separa liar di Timur Laut India dari April hingga September.[5,6,7]H. cordataterdapat di India, terutamanya di lembah Brahmaputra Assam dan digunakan oleh pelbagai suku kaum Assam dalam bentuk sayur-sayuran serta dalam pelbagai tujuan perubatan secara tradisional.
-
100% Pengeluar minyak PureArctium lappa – Minyak Lime Arctium lappa Asli dengan Sijil Jaminan Kualiti
Faedah Kesihatan
Akar burdock sering dimakan, tetapi juga boleh dikeringkan dan direndam ke dalam teh. Ia berfungsi dengan baik sebagai sumber inulin, aprebiotikserat yang membantu penghadaman dan meningkatkan kesihatan usus. Selain itu, akar ini mengandungi flavonoid (nutrien tumbuhan),fitokimia, dan antioksidan yang diketahui mempunyai manfaat kesihatan.
Di samping itu, akar burdock boleh memberikan faedah lain seperti:
Mengurangkan Keradangan Kronik Akar burdock mengandungi beberapa antioksidan, seperti kuersetin, asid fenolik, dan luteolin, yang boleh membantu melindungi sel anda daripadaradikal bebas. Antioksidan ini membantu mengurangkan keradangan di seluruh badan.
Risiko Kesihatan
Akar burdock dianggap selamat untuk dimakan atau diminum sebagai teh. Walau bagaimanapun, tumbuhan ini hampir menyerupai tumbuhan belladonna nightshade, yang beracun. Anda disyorkan untuk hanya membeli akar burdock daripada penjual yang dipercayai dan mengelak daripada mengumpulnya sendiri. Selain itu, terdapat maklumat minimum tentang kesannya terhadap kanak-kanak atau wanita hamil. Bercakap dengan doktor anda sebelum menggunakan akar burdock dengan kanak-kanak atau jika anda hamil.
Berikut adalah beberapa risiko kesihatan lain yang mungkin untuk dipertimbangkan jika menggunakan akar burdock:
Peningkatan Dehidrasi
Akar burdock bertindak seperti diuretik semula jadi, yang boleh menyebabkan dehidrasi. Jika anda mengambil pil air atau diuretik lain, anda tidak boleh mengambil akar burdock. Jika anda mengambil ubat-ubatan ini, adalah penting untuk mengetahui tentang ubat, herba dan bahan lain yang boleh menyebabkan dehidrasi.
Tindak balas alahan
Jika anda sensitif atau mempunyai sejarah tindak balas alahan terhadap bunga aster, ragweed atau kekwa, anda berisiko lebih tinggi untuk tindak balas alahan terhadap akar burdock.
-
Harga pukal borong 100% Minyak Pure AsariRadix Et Rhizoma Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Kajian haiwan dan in vitro telah menyiasat potensi kesan antikulat, anti-radang dan kardiovaskular sassafras dan komponennya. Walau bagaimanapun, ujian klinikal kurang, dan sassafras tidak dianggap selamat untuk digunakan. Safrole, konstituen utama kulit dan minyak akar sassafras, telah diharamkan oleh Pentadbiran Makanan dan Ubat (FDA) AS, termasuk untuk digunakan sebagai perasa atau pewangi, dan tidak boleh digunakan secara dalaman atau luaran, kerana ia berpotensi karsinogenik. Safrole telah digunakan dalam pengeluaran haram 3,4-methylene-dioxymethamphetamine (MDMA), juga dikenali dengan nama jalan "ecstasy" atau "Molly," dan penjualan minyak safrole dan sassafras dipantau oleh Pentadbiran Penguatkuasaan Dadah AS
-
Harga pukal borong 100% Minyak pati Stellariae Radix tulen (baru) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
The Chinese Pharmacopoeia (edisi 2020) memerlukan ekstrak metanol YCH tidak boleh kurang daripada 20.0% [2], tanpa penunjuk penilaian kualiti lain dinyatakan. Hasil kajian ini menunjukkan bahawa kandungan ekstrak metanol sampel liar dan yang diusahakan kedua-duanya menepati piawaian farmakope, dan tidak terdapat perbezaan yang signifikan antaranya. Oleh itu, tidak terdapat perbezaan kualiti yang jelas antara sampel liar dan ditanam, mengikut indeks itu. Walau bagaimanapun, kandungan jumlah sterol dan jumlah flavonoid dalam sampel liar adalah jauh lebih tinggi daripada kandungan dalam sampel yang ditanam. Analisis metabolomik selanjutnya mendedahkan kepelbagaian metabolit yang banyak antara sampel liar dan ditanam. Selain itu, 97 metabolit yang berbeza secara ketara telah disaring, yang disenaraikan dalamJadual Tambahan S2. Antara metabolit yang berbeza secara ketara ini ialah β-sitosterol (ID ialah M397T42) dan derivatif kuersetin (M447T204_2), yang telah dilaporkan sebagai bahan aktif. Juzuk yang tidak dilaporkan sebelum ini, seperti trigonelline (M138T291_2), betaine (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenone (M241T189), arctiin (M557T165) dan asid loganik (M399T284_2) juga termasuk antara metabolit yang berbeza. Komponen ini memainkan pelbagai peranan dalam anti-pengoksidaan, anti-radang, menghilangkan radikal bebas, anti-kanser dan merawat aterosklerosis dan, oleh itu, mungkin membentuk komponen aktif novel yang diduga dalam YCH. Kandungan bahan aktif menentukan keberkesanan dan kualiti bahan perubatan [7]. Secara ringkasnya, ekstrak metanol sebagai satu-satunya indeks penilaian kualiti YCH mempunyai beberapa batasan, dan penanda kualiti yang lebih khusus perlu diterokai dengan lebih lanjut. Terdapat perbezaan ketara dalam jumlah sterol, jumlah flavonoid dan kandungan banyak metabolit berbeza antara YCH liar dan ditanam; jadi, terdapat kemungkinan beberapa perbezaan kualiti antara mereka. Pada masa yang sama, bahan aktif berpotensi yang baru ditemui dalam YCH mungkin mempunyai nilai rujukan penting untuk kajian asas fungsi YCH dan pembangunan lanjut sumber YCH.
Kepentingan bahan perubatan tulen telah lama diiktiraf di wilayah asal tertentu untuk menghasilkan ubat-ubatan herba Cina yang berkualiti tinggi [8]. Kualiti tinggi adalah sifat penting bahan perubatan tulen, dan habitat merupakan faktor penting yang mempengaruhi kualiti bahan tersebut. Sejak YCH mula digunakan sebagai ubat, ia telah lama dikuasai oleh YCH liar. Berikutan kejayaan pengenalan dan pembiakan YCH di Ningxia pada tahun 1980-an, sumber bahan perubatan Yinchaihu secara beransur-ansur beralih daripada YCH liar kepada ditanam. Menurut penyiasatan sebelumnya terhadap sumber YCH [9] dan penyiasatan lapangan kumpulan penyelidikan kami, terdapat perbezaan yang ketara dalam kawasan pengedaran bahan ubatan yang ditanam dan liar. YCH liar diedarkan terutamanya di Wilayah Autonomi Ningxia Hui di Wilayah Shaanxi, bersebelahan dengan zon gersang Mongolia Dalam dan tengah Ningxia. Khususnya, padang rumput padang pasir di kawasan ini adalah habitat yang paling sesuai untuk pertumbuhan YCH. Sebaliknya, YCH yang ditanam diedarkan terutamanya di selatan kawasan pengedaran liar, seperti Daerah Tongxin (Ditanam I) dan kawasan sekitarnya, yang telah menjadi pangkalan penanaman dan pengeluaran terbesar di China, dan Daerah Pengyang (Dibudidayakan II) , yang terletak di kawasan yang lebih selatan dan merupakan satu lagi kawasan pengeluaran untuk YCH yang ditanam. Selain itu, habitat kedua-dua kawasan penanaman di atas bukanlah padang pasir padang pasir. Oleh itu, sebagai tambahan kepada cara pengeluaran, terdapat juga perbezaan yang ketara dalam habitat YCH liar dan ditanam. Habitat merupakan faktor penting yang mempengaruhi kualiti bahan ubatan herba. Habitat yang berbeza akan menjejaskan pembentukan dan pengumpulan metabolit sekunder dalam tumbuhan, seterusnya menjejaskan kualiti produk perubatan [10,11]. Oleh itu, perbezaan ketara dalam kandungan jumlah flavonoid dan jumlah sterol dan ekspresi 53 metabolit yang kami temui dalam kajian ini mungkin hasil daripada pengurusan ladang dan perbezaan habitat.Salah satu cara utama persekitaran mempengaruhi kualiti bahan ubatan adalah dengan memberi tekanan pada tumbuhan sumber. Tekanan persekitaran yang sederhana cenderung untuk merangsang pengumpulan metabolit sekunder [12,13]. Hipotesis keseimbangan pertumbuhan/pembezaan menyatakan bahawa, apabila nutrien dalam bekalan yang mencukupi, tumbuh-tumbuhan terutamanya tumbuh, manakala apabila nutrien kekurangan, tumbuhan terutamanya membezakan dan menghasilkan lebih banyak metabolit sekunder [14]. Tekanan kemarau yang disebabkan oleh kekurangan air merupakan tekanan alam sekitar utama yang dihadapi oleh tumbuhan di kawasan gersang. Dalam kajian ini, keadaan air YCH yang ditanam adalah lebih banyak, dengan paras kerpasan tahunan jauh lebih tinggi berbanding dengan YCH liar (bekalan air untuk Tanam I adalah kira-kira 2 kali ganda daripada Wild; Tanam II adalah kira-kira 3.5 kali ganda daripada Wild ). Selain itu, tanah di persekitaran liar adalah tanah berpasir, tetapi tanah di tanah ladang adalah tanah liat. Berbanding dengan tanah liat, tanah berpasir mempunyai kapasiti penahanan air yang lemah dan lebih berkemungkinan memburukkan tekanan kemarau. Pada masa yang sama, proses penanaman sering disertai dengan penyiraman, jadi tahap tekanan kemarau adalah rendah. YCH liar tumbuh di habitat gersang semula jadi yang keras, dan oleh itu ia mungkin mengalami tekanan kemarau yang lebih serius.Osmoregulasi ialah mekanisme fisiologi penting di mana tumbuhan mengatasi tekanan kemarau, dan alkaloid ialah pengawal selia osmotik yang penting dalam tumbuhan yang lebih tinggi [15]. Betaine ialah sebatian ammonium kuaterner alkaloid larut air dan boleh bertindak sebagai osmoprotectants. Tekanan kemarau boleh mengurangkan potensi osmotik sel, manakala osmoprotektan memelihara dan mengekalkan struktur dan integriti makromolekul biologi, dan berkesan mengurangkan kerosakan yang disebabkan oleh tekanan kemarau kepada tumbuhan [16]. Sebagai contoh, di bawah tekanan kemarau, kandungan betaine bit gula dan Lycium barbarum meningkat dengan ketara [17,18]. Trigonelline ialah pengawal selia pertumbuhan sel, dan di bawah tekanan kemarau, ia boleh memanjangkan panjang kitaran sel tumbuhan, menghalang pertumbuhan sel dan membawa kepada pengecutan volum sel. Peningkatan relatif dalam kepekatan zat terlarut dalam sel membolehkan tumbuhan mencapai peraturan osmotik dan meningkatkan keupayaannya untuk menahan tekanan kemarau [19]. JIA X [20] mendapati bahawa, dengan peningkatan tekanan kemarau, Astragalus membranaceus (sumber perubatan tradisional Cina) menghasilkan lebih banyak trigonel, yang bertindak untuk mengawal potensi osmotik dan meningkatkan keupayaan untuk menahan tekanan kemarau. Flavonoid juga telah ditunjukkan memainkan peranan penting dalam ketahanan tumbuhan terhadap tekanan kemarau [21,22]. Sebilangan besar kajian telah mengesahkan bahawa tekanan kemarau sederhana adalah kondusif kepada pengumpulan flavonoid. Lang Duo-Yong et al. [23] membandingkan kesan tekanan kemarau ke atas YCH dengan mengawal kapasiti pegangan air di ladang. Didapati bahawa tekanan kemarau menghalang pertumbuhan akar pada tahap tertentu, tetapi dalam tekanan kemarau yang sederhana dan teruk (40% kapasiti pegangan air di padang), jumlah kandungan flavonoid dalam YCH meningkat. Sementara itu, di bawah tekanan kemarau, fitosterol boleh bertindak mengawal kecairan dan kebolehtelapan membran sel, menghalang kehilangan air dan meningkatkan rintangan tekanan [24,25]. Oleh itu, peningkatan pengumpulan jumlah flavonoid, jumlah sterol, betaine, trigonelline dan metabolit sekunder lain dalam YCH liar mungkin berkaitan dengan tekanan kemarau berintensiti tinggi.Dalam kajian ini, analisis pengayaan laluan KEGG dilakukan ke atas metabolit yang didapati berbeza dengan ketara antara YCH liar dan yang ditanam. Metabolit yang diperkaya termasuk yang terlibat dalam laluan metabolisme askorbat dan aldarat, biosintesis aminoacyl-tRNA, metabolisme histidine dan metabolisme beta-alanine. Laluan metabolik ini berkait rapat dengan mekanisme rintangan tekanan tumbuhan. Antaranya, metabolisme askorbat memainkan peranan penting dalam penghasilan antioksidan tumbuhan, metabolisme karbon dan nitrogen, rintangan tekanan dan fungsi fisiologi yang lain.26]; biosintesis aminoacyl-tRNA ialah laluan penting untuk pembentukan protein [27,28], yang terlibat dalam sintesis protein tahan tekanan. Kedua-dua laluan histidin dan β-alanine boleh meningkatkan toleransi tumbuhan terhadap tekanan persekitaran [29,30]. Ini seterusnya menunjukkan bahawa perbezaan dalam metabolit antara YCH liar dan ditanam berkait rapat dengan proses rintangan tekanan.Tanah adalah asas bahan untuk pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan ubatan. Nitrogen (N), fosforus (P) dan kalium (K) dalam tanah merupakan unsur nutrien yang penting untuk pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan. Bahan organik tanah juga mengandungi N, P, K, Zn, Ca, Mg dan unsur makro dan unsur surih lain yang diperlukan untuk tumbuhan ubatan. Nutrien yang berlebihan atau kekurangan, atau nisbah nutrien yang tidak seimbang, akan menjejaskan pertumbuhan dan perkembangan serta kualiti bahan ubatan, dan tumbuhan yang berbeza mempunyai keperluan nutrien yang berbeza [31,32,33]. Sebagai contoh, tekanan N yang rendah menggalakkan sintesis alkaloid dalam Isatis indigotica, dan memberi manfaat kepada pengumpulan flavonoid dalam tumbuhan seperti Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge dan Dichondra repens Forst. Sebaliknya, terlalu banyak N menghalang pengumpulan flavonoid dalam spesies seperti Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis dan Ginkgo biloba, dan menjejaskan kualiti bahan perubatan [34]. Penggunaan baja P berkesan dalam meningkatkan kandungan asid glycyrrhizic dan dihydroacetone dalam licorice Ural [35]. Apabila jumlah penggunaan melebihi 0·12 kg·m−2, jumlah kandungan flavonoid dalam Tussilago farfara menurun [36]. Penggunaan baja P memberi kesan negatif terhadap kandungan polisakarida dalam perubatan tradisional Cina rhizoma polygonati [37], tetapi baja K berkesan dalam meningkatkan kandungan saponinnya [38]. Penggunaan baja 450 kg·hm−2 K adalah yang terbaik untuk pertumbuhan dan pengumpulan saponin Panax notoginseng berumur dua tahun [39]. Di bawah nisbah N:P:K = 2:2:1, jumlah keseluruhan ekstrak hidroterma, harpagide dan harpagoside adalah yang tertinggi [40]. Nisbah N, P dan K yang tinggi bermanfaat untuk menggalakkan pertumbuhan Pogostemon cablin dan meningkatkan kandungan minyak meruap. Nisbah N, P dan K yang rendah meningkatkan kandungan komponen berkesan utama minyak daun batang Pogostemon cablin [41]. YCH ialah tumbuhan toleran tanah tandus, dan ia mungkin mempunyai keperluan khusus untuk nutrien seperti N, P dan K. Dalam kajian ini, berbanding dengan YCH yang ditanam, tanah tumbuhan YCH liar agak tandus: kandungan tanah daripada bahan organik, jumlah N, jumlah P dan jumlah K adalah masing-masing kira-kira 1/10, 1/2, 1/3 dan 1/3 daripada tumbuhan yang ditanam. Oleh itu, perbezaan dalam nutrien tanah mungkin menjadi sebab lain untuk perbezaan antara metabolit yang dikesan dalam YCH yang ditanam dan liar. Weibao Ma et al. [42] mendapati bahawa penggunaan sejumlah baja N dan baja P dengan ketara meningkatkan hasil dan kualiti benih. Walau bagaimanapun, kesan unsur nutrien terhadap kualiti YCH tidak jelas, dan langkah pembajaan untuk meningkatkan kualiti bahan ubatan memerlukan kajian lanjut.Ubat herba Cina mempunyai ciri-ciri "Habitat yang menggalakkan menggalakkan hasil, dan habitat yang tidak menguntungkan meningkatkan kualiti" [43]. Dalam proses peralihan beransur-ansur dari liar kepada YCH yang ditanam, habitat tumbuhan berubah daripada padang pasir yang gersang dan tandus kepada tanah ladang yang subur dengan air yang lebih banyak. Habitat YCH yang ditanam adalah unggul dan hasil yang lebih tinggi, yang membantu untuk memenuhi permintaan pasaran. Walau bagaimanapun, habitat unggul ini membawa kepada perubahan ketara dalam metabolit YCH; sama ada ini kondusif untuk meningkatkan kualiti YCH dan bagaimana untuk mencapai pengeluaran YCH berkualiti tinggi melalui langkah penanaman berasaskan sains akan memerlukan penyelidikan lanjut.Penanaman habitat simulasi ialah kaedah mensimulasikan habitat dan keadaan persekitaran tumbuhan ubatan liar, berdasarkan pengetahuan tentang penyesuaian jangka panjang tumbuhan terhadap tekanan persekitaran tertentu [43]. Dengan mensimulasikan pelbagai faktor persekitaran yang mempengaruhi tumbuhan liar, terutamanya habitat asal tumbuhan yang digunakan sebagai sumber bahan ubatan asli, pendekatan ini menggunakan reka bentuk saintifik dan campur tangan manusia yang inovatif untuk mengimbangi pertumbuhan dan metabolisme sekunder tumbuhan ubatan Cina [43]. Kaedah-kaedah tersebut bertujuan untuk mencapai susunan optimum bagi pembangunan bahan-bahan perubatan berkualiti tinggi. Penanaman habitat simulasi harus menyediakan cara yang berkesan untuk pengeluaran YCH berkualiti tinggi walaupun asas farmakodinamik, penanda kualiti dan mekanisme tindak balas kepada faktor persekitaran tidak jelas. Sehubungan itu, kami mencadangkan supaya reka bentuk saintifik dan langkah pengurusan ladang dalam penanaman dan pengeluaran YCH perlu dijalankan dengan merujuk kepada ciri-ciri persekitaran YCH liar, seperti keadaan tanah yang gersang, tandus dan berpasir. Pada masa yang sama, pengkaji juga diharap dapat menjalankan kajian yang lebih mendalam mengenai asas bahan berfungsi dan penanda kualiti YCH. Kajian ini boleh menyediakan kriteria penilaian yang lebih berkesan untuk YCH, dan menggalakkan pengeluaran berkualiti tinggi dan pembangunan mampan industri. -
Minyak Fructus Amomi Herba Peresap urut semula jadi 1kg Minyak pati Amomum villosum Pukal
Keluarga Zingiberaceae telah menarik perhatian yang semakin meningkat dalam penyelidikan alelopati kerana minyak meruap yang kaya dan aromatik spesies ahlinya. Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa bahan kimia daripada Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] dan Zingiber officinale Rosc. [42] daripada keluarga halia mempunyai kesan alelopati terhadap percambahan benih dan pertumbuhan anak benih jagung, salad dan tomato. Kajian semasa kami ialah laporan pertama mengenai aktiviti alelopati meruap daripada batang, daun dan buah muda A. villosum (ahli keluarga Zingiberaceae). Hasil minyak batang, daun, dan buah muda masing-masing adalah 0.15%, 0.40%, dan 0.50%, menunjukkan bahawa buah menghasilkan kuantiti minyak meruap yang lebih besar daripada batang dan daun. Komponen utama minyak meruap daripada batang ialah β-pinene, β-phellandrene dan α-pinene, yang merupakan corak yang serupa dengan bahan kimia utama minyak daun, β-pinene dan α-pinene (hidrokarbon monoterpena). Sebaliknya, minyak dalam buah-buahan muda kaya dengan bornyl acetate dan camphor (monoterpenes beroksigen). Hasilnya disokong oleh penemuan Do N Dai [30,32] dan Hui Ao [31] yang telah mengenal pasti minyak daripada organ A. villosum yang berbeza.
Terdapat beberapa laporan mengenai aktiviti perencatan pertumbuhan tumbuhan sebatian utama ini dalam spesies lain. Shalinder Kaur mendapati bahawa α-pinene daripada kayu putih menyekat panjang akar dan ketinggian pucuk Amaranthus viridis L. pada kepekatan 1.0 μL [43], dan kajian lain menunjukkan bahawa α-pinene menghalang pertumbuhan akar awal dan menyebabkan kerosakan oksidatif dalam tisu akar melalui peningkatan penjanaan spesies oksigen reaktif [44]. Beberapa laporan berpendapat bahawa β-pinene menghalang percambahan dan pertumbuhan anak benih rumpai ujian dalam cara tindak balas yang bergantung kepada dos dengan mengganggu integriti membran [45], mengubah biokimia tumbuhan dan meningkatkan aktiviti peroksidase dan polifenol oksidase [46]. β-Phellandrene mempamerkan perencatan maksimum kepada percambahan dan pertumbuhan Vigna unguiculata (L.) Walp pada kepekatan 600 ppm [47], manakala, pada kepekatan 250 mg/m3, kapur barus menyekat pertumbuhan radikel dan pucuk Lepidium sativum L. [48]. Walau bagaimanapun, penyelidikan yang melaporkan kesan alelopati bornyl asetat adalah sedikit. Dalam kajian kami, kesan alelopati β-pinene, bornyl asetat dan kapur barus pada panjang akar adalah lebih lemah daripada minyak meruap kecuali α-pinene, manakala minyak daun, kaya dengan α-pinene, juga lebih fitotoksik daripada meruap yang sepadan. minyak daripada batang dan buah A. villosum, kedua-dua penemuan menunjukkan bahawa α-pinene mungkin bahan kimia penting untuk alelopati oleh spesies ini. Pada masa yang sama, keputusan juga menunjukkan bahawa beberapa sebatian dalam minyak buah yang tidak banyak mungkin menyumbang kepada pengeluaran kesan fitotoksik, satu penemuan yang memerlukan penyelidikan lanjut pada masa hadapan.Di bawah keadaan biasa, kesan alelopati alelokimia adalah khusus spesies. Jiang et al. mendapati bahawa minyak pati yang dihasilkan oleh Artemisia sieversiana memberikan kesan yang lebih kuat pada Amaranthus retroflexus L. berbanding dengan Medicago sativa L., Poa annua L., dan Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. Dalam kajian lain, minyak meruap Lavandula angustifolia Mill. menghasilkan tahap kesan fitotoksik yang berbeza pada spesies tumbuhan yang berbeza. Lolium multiflorum Lam. adalah spesies penerima yang paling sensitif, pertumbuhan hipokotil dan radikel dihalang oleh 87.8% dan 76.7%, masing-masing, pada dos 1 μL/mL minyak, tetapi pertumbuhan anak benih timun hipokotil hampir tidak terjejas.20]. Keputusan kami juga menunjukkan bahawa terdapat perbezaan sensitiviti kepada A. villosum volatiles antara L. sativa dan L. perenne.Sebatian meruap dan minyak pati spesies yang sama boleh berbeza secara kuantitatif dan/atau kualitatif kerana keadaan pertumbuhan, bahagian tumbuhan dan kaedah pengesanan. Sebagai contoh, laporan menunjukkan bahawa piranoid (10.3%) dan β-caryophyllene (6.6%) adalah sebatian utama meruap yang dipancarkan daripada daun Sambucus nigra, manakala benzaldehid (17.8%), α-bulnesene (16.6%) dan tetracosane (11.5%) banyak terdapat dalam minyak yang diekstrak daripada daun [50]. Dalam kajian kami, sebatian meruap yang dikeluarkan oleh bahan tumbuhan segar mempunyai kesan alelopati yang lebih kuat pada tumbuhan ujian berbanding minyak meruap yang diekstrak, perbezaan tindak balas berkait rapat dengan perbezaan alelokimia yang terdapat dalam kedua-dua persediaan. Perbezaan tepat antara sebatian meruap dan minyak perlu disiasat lebih lanjut dalam eksperimen seterusnya.Perbezaan dalam kepelbagaian mikrob dan struktur komuniti mikrob dalam sampel tanah yang mana minyak meruap telah ditambah adalah berkaitan dengan persaingan antara mikroorganisma serta sebarang kesan toksik dan tempoh minyak meruap dalam tanah. Vokou dan Liotiri [51] mendapati bahawa penggunaan empat minyak pati (0.1 mL) masing-masing pada tanah yang ditanam (150 g) mengaktifkan respirasi sampel tanah, malah minyak berbeza dalam komposisi kimianya, menunjukkan bahawa minyak tumbuhan digunakan sebagai karbon dan sumber tenaga oleh mikroorganisma tanah yang berlaku. Data yang diperolehi daripada kajian semasa mengesahkan bahawa minyak daripada keseluruhan tumbuhan A. villosum menyumbang kepada peningkatan ketara dalam bilangan spesies kulat tanah pada hari ke-14 selepas penambahan minyak, menunjukkan bahawa minyak boleh menyediakan sumber karbon untuk lebih banyak lagi. kulat tanah. Kajian lain melaporkan penemuan: mikroorganisma tanah memulihkan fungsi awal dan biojisimnya selepas tempoh sementara variasi yang disebabkan oleh penambahan minyak Thymbra capitata L. (Cav), tetapi minyak pada dos tertinggi (0.93 µL minyak per gram tanah) tidak membenarkan mikroorganisma tanah memulihkan kefungsian awal [52]. Dalam kajian semasa, berdasarkan analisis mikrobiologi tanah selepas dirawat dengan hari dan kepekatan yang berbeza, kami membuat spekulasi bahawa komuniti bakteria tanah akan pulih selepas lebih banyak hari. Sebaliknya, mikrobiota kulat tidak boleh kembali kepada keadaan asalnya. Keputusan berikut mengesahkan hipotesis ini: kesan berbeza kepekatan tinggi minyak pada komposisi mikrobiom kulat tanah telah didedahkan oleh analisis koordinat utama (PCoA), dan pembentangan peta haba mengesahkan lagi bahawa komposisi komuniti kulat tanah dirawat dengan 3.0 mg/mL minyak (iaitu 0.375 mg minyak per gram tanah) pada peringkat genus berbeza dengan ketara daripada rawatan lain. Pada masa ini, penyelidikan tentang kesan penambahan hidrokarbon monoterpena atau monoterpena beroksigen terhadap kepelbagaian mikrob tanah dan struktur komuniti masih kurang. Beberapa kajian melaporkan bahawa α-pinene meningkatkan aktiviti mikrob tanah dan kelimpahan relatif Methylophilaceae (sekumpulan methylotrophs, Proteobacteria) di bawah kandungan lembapan yang rendah, memainkan peranan penting sebagai sumber karbon dalam tanah yang lebih kering [53]. Begitu juga, minyak meruap keseluruhan tumbuhan A. villosum, mengandungi 15.03% α-pinene (Jadual Tambahan S1), jelas meningkatkan kelimpahan relatif Proteobacteria pada 1.5 mg/mL dan 3.0 mg/mL, yang mencadangkan bahawa α-pinene mungkin bertindak sebagai salah satu sumber karbon untuk mikroorganisma tanah.Sebatian meruap yang dihasilkan oleh organ A. villosum yang berbeza mempunyai pelbagai darjah kesan alelopati pada L. sativa dan L. perenne, yang berkait rapat dengan juzuk kimia yang terkandung dalam bahagian tumbuhan A. villosum. Walaupun komposisi kimia minyak meruap telah disahkan, sebatian meruap yang dikeluarkan oleh A. villosum pada suhu bilik tidak diketahui, yang memerlukan penyiasatan lanjut. Selain itu, kesan sinergistik antara alelokimia yang berbeza juga patut dipertimbangkan. Dari segi mikroorganisma tanah, untuk meneroka kesan minyak meruap ke atas mikroorganisma tanah secara menyeluruh, kita masih perlu menjalankan penyelidikan yang lebih mendalam: memanjangkan masa rawatan minyak meruap dan membezakan variasi dalam komposisi kimia minyak meruap dalam tanah. pada hari yang berbeza. -
Minyak tulen Artemisia capillaris untuk lilin dan sabun membuat minyak pati peresap borong baharu untuk peresap pembakar buluh
Reka bentuk model tikus
Haiwan itu dibahagikan secara rawak kepada lima kumpulan lima belas tikus setiap satu. Kumpulan kawalan dan kumpulan model tikus telah digavage denganminyak bijanselama 6 hari. Tikus kumpulan kawalan positif telah digavage dengan tablet bifendate (BT, 10 mg / kg) selama 6 hari. Kumpulan eksperimen telah dirawat dengan 100 mg/kg dan 50 mg/kg AEO yang dilarutkan dalam minyak bijan selama 6 hari. Pada hari ke-6, kumpulan kawalan telah dirawat dengan minyak bijan, dan semua kumpulan lain dirawat dengan dos tunggal 0.2% CCl4 dalam minyak bijan (10 ml/kg) sebanyaksuntikan intraperitoneal. Tikus kemudiannya berpuasa tanpa air, dan sampel darah dikumpulkan dari saluran retrobulbar; darah yang dikumpul telah disentrifugasi pada 3000 ×gselama 10 minit untuk memisahkan serum.Dislokasi serviksdilakukan sejurus selepas pengeluaran darah, dan sampel hati segera dikeluarkan. Satu bahagian sampel hati segera disimpan pada -20 °C sehingga analisis, dan bahagian lain dikeluarkan dan diperbaiki dalam 10%formalinpenyelesaian; baki tisu disimpan pada -80 °C untuk analisis histopatologi (Wang et al., 2008,Hsu et al., 2009,Nie et al., 2015).
Pengukuran parameter biokimia dalam serum
Kecederaan hati dinilai dengan menganggarkanaktiviti enzimatikserum ALT dan AST menggunakan kit komersial yang sepadan mengikut arahan untuk kit (Nanjing, Wilayah Jiangsu, China). Aktiviti enzimatik dinyatakan sebagai unit seliter (U/l).
Pengukuran MDA, SOD, GSH dan GSH-Pxdalam homogenat hati
Tisu hati dihomogenkan dengan garam fisiologi sejuk pada nisbah 1: 9 (w / v, hati: garam). Homogenat telah disentrifugasi (2500 ×gselama 10 min) untuk mengumpul supernatan untuk penentuan seterusnya. Kerosakan hati dinilai mengikut ukuran hepatik tahap MDA dan GSH serta SOD dan GSH-Pxaktiviti. Semua ini ditentukan mengikut arahan pada kit (Nanjing, Wilayah Jiangsu, China). Keputusan untuk MDA dan GSH dinyatakan sebagai nmol per mg protein (nmol/mg prot), dan aktiviti SOD dan GSH-Pxdinyatakan sebagai U per mg protein (U/mg prot).
Analisis histopatologi
Bahagian hati yang baru diperolehi telah ditetapkan dalam penimbal 10%.paraformaldehidlarutan fosfat. Sampel kemudian dibenamkan dalam parafin, dihiris kepada bahagian 3-5 μm, diwarnai denganhematoksilindaneosin(H&E) mengikut prosedur standard, dan akhirnya dianalisis olehmikroskop cahaya(Tian et al., 2012).
Analisis statistik
Keputusan dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (SD). Keputusan dianalisis menggunakan program statistik SPSS Statistics, versi 19.0. Data telah tertakluk kepada analisis varians (ANOVA,p< 0.05) diikuti dengan ujian Dunnett dan ujian T3 Dunnett untuk menentukan perbezaan yang signifikan secara statistik antara nilai pelbagai kumpulan eksperimen. Perbezaan yang ketara telah dipertimbangkan pada tahapp< 0.05.
Keputusan dan perbincangan
Konstituen AEO
Selepas analisis GC/MS, AEO didapati mengandungi 25 juzuk yang dicairkan dari 10 hingga 35 minit, dan 21 juzuk yang menyumbang 84% daripada minyak pati telah dikenal pasti (Jadual 1). Minyak meruap yang terkandungmonoterpenoid(80.9%), seskuiterpenoid (9.5%), hidrokarbon tak bercabang tepu (4.86%) dan pelbagai asetilena (4.86%). Berbanding dengan kajian lain (Guo et al., 2004), kami menemui monoterpenoid yang banyak (80.90%) dalam AEO. Keputusan menunjukkan konstituen AEO yang paling banyak ialah β-sitronellol (16.23%). Komponen utama lain AEO termasuk 1,8-cineole (13.9%),kapur barus(12.59%),linalool(11.33%), α-pinene (7.21%), β-pinene (3.99%),timol(3.22%), danmyrcene(2.02%). Perubahan dalam komposisi kimia mungkin berkaitan dengan keadaan persekitaran yang terdedah kepada tumbuhan, seperti air mineral, cahaya matahari, peringkat pembangunan danpemakanan.
-
Minyak Saposhnikovia divaricata tulen untuk pembuatan lilin dan sabun minyak pati peresap borong baharu untuk peresap pembakar buluh
2.1. Penyediaan SDE
Rizom SD dibeli sebagai herba kering daripada Hanherb Co. (Guri, Korea). Bahan tumbuhan telah disahkan secara taksonomi oleh Dr. Go-Ya Choi dari Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Satu spesimen baucar (nombor 2014 SDE-6) telah disimpan dalam Herbarium Sumber Herba Standard Korea. Rizom kering SD (320 g) diekstrak dua kali dengan etanol 70% (dengan refluks 2 jam) dan ekstrak kemudiannya dipekatkan di bawah tekanan yang dikurangkan. Air rebusan itu ditapis, diliofilkan, dan disimpan pada suhu 4°C. Hasil ekstrak kering daripada bahan permulaan mentah ialah 48.13% (b/b).
2.2. Analisis Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi (HPLC) Kuantitatif
Analisis kromatografi dilakukan dengan sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) dan pengesan tatasusunan fotodiod. Untuk analisis HPLC SDE,O-glucosylcimifugin standard telah dibeli daripada Institut Promosi Korea untuk Industri Perubatan Tradisional (Gyeongsan, Korea), dansec-O-glucosylhamaudol dan 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol telah diasingkan dalam makmal kami dan dikenal pasti melalui analisis spektrum, terutamanya oleh NMR dan MS.
Sampel SDE (0.1 mg) telah dibubarkan dalam 70% etanol (10 mL). Pemisahan kromatografi dilakukan dengan lajur XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, Amerika Syarikat). Fasa bergerak terdiri daripada asetonitril (A) dan 0.1% asid asetik dalam air (B) pada kadar aliran 1.0 mL/min. Program kecerunan berbilang langkah telah digunakan seperti berikut: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), dan 20–65% A (23–40 min). ). Panjang gelombang pengesanan telah diimbas pada 210-400 nm dan direkodkan pada 254 nm. Isipadu suntikan ialah 10.0μL. Larutan piawai untuk penentuan tiga kromo telah disediakan pada kepekatan akhir 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol), dan 31.125 mg/mL (sec-O-glucosylhamaudol) dalam metanol dan disimpan pada suhu 4°C.
2.3. Penilaian Aktiviti Anti-RadangDalam Vitro
2.3.1. Kultur Sel dan Rawatan Sampel
Sel RAW 264.7 diperolehi daripada Koleksi Budaya Jenis Amerika (ATCC, Manassas, VA, Amerika Syarikat) dan ditanam dalam medium DMEM yang mengandungi 1% antibiotik dan 5.5% FBS. Sel telah diinkubasi dalam suasana lembap sebanyak 5% CO2 pada 37°C. Untuk merangsang sel, medium telah digantikan dengan medium DMEM segar, dan lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) pada 1μg/mL ditambah dengan ada atau tiada SDE (200 atau 400μg/mL) selama 24 jam tambahan.
2.3.2. Penentuan Nitrik Oksida (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Faktor Nekrosis Tumor-α(TNF-α), dan Pengeluaran Interleukin-6 (IL-6).
Sel telah dirawat dengan SDE dan dirangsang dengan LPS selama 24 jam. Pengeluaran NO dianalisis dengan mengukur nitrit menggunakan reagen Griess mengikut kajian lepas [12]. Rembesan sitokin radang PGE2, TNF-α, dan IL-6 ditentukan menggunakan kit ELISA (sistem R&D) mengikut arahan pengilang. Kesan SDE pada pengeluaran NO dan sitokin ditentukan pada 540 nm atau 450 nm menggunakan Wallac EnVision™pembaca plat mikro (PerkinElmer).
2.4. Penilaian Aktiviti AntiosteoartritisDalam Vivo
2.4.1. Haiwan
Tikus jantan Sprague-Dawley (7 minggu) telah dibeli daripada Samtako Inc. (Osan, Korea) dan ditempatkan dalam keadaan terkawal dengan kitaran cahaya/gelap 12 jam di°C dan% kelembapan. Tikus dibekalkan dengan diet makmal dan airad libitum. Semua prosedur eksperimen dilakukan dengan mematuhi garis panduan Institut Kesihatan Nasional (NIH) dan diluluskan oleh Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan universiti Daejeon (Daejeon, republik Korea).
2.4.2. Induksi OA dengan MIA dalam Tikus
Haiwan tersebut secara rawak dan diberikan kepada kumpulan rawatan sebelum permulaan kajian (setiap kumpulan). Larutan MIA (3 mg/50μL 0.9% saline) disuntik terus ke dalam ruang intra-artikular lutut kanan di bawah bius yang disebabkan dengan campuran ketamin dan xylazine. Tikus dibahagikan secara rawak kepada empat kumpulan: (1) kumpulan salin tanpa suntikan MIA, (2) kumpulan MIA dengan suntikan MIA, (3) kumpulan yang dirawat SDE (200 mg/kg) dengan suntikan MIA, dan (4 ) kumpulan yang dirawat indomethacin- (IM-) (2 mg/kg) dengan suntikan MIA. Tikus diberikan secara lisan dengan SDE dan IM 1 minggu sebelum suntikan MIA selama 4 minggu. Dos SDE dan IM yang digunakan dalam kajian ini adalah berdasarkan yang digunakan dalam kajian lepas [10,13,14].
2.4.3. Pengukuran Taburan Galas Berat Hindpaw
Selepas induksi OA, keseimbangan asal dalam keupayaan menanggung berat kaki belakang telah terganggu. Penguji ketidakupayaan (instrumen Linton, Norfolk, UK) digunakan untuk menilai perubahan dalam toleransi menanggung berat. Tikus diletakkan dengan berhati-hati ke dalam ruang pengukur. Daya menanggung berat yang dikenakan oleh anggota belakang adalah purata dalam tempoh 3 saat. Nisbah taburan berat dikira dengan persamaan berikut: [berat pada anggota belakang kanan/(berat pada anggota belakang kanan + berat pada anggota belakang kiri)] × 100 [15].
2.4.4. Pengukuran Tahap Sitokin Serum
Sampel darah telah disentrifugasi pada 1,500 g selama 10 minit pada suhu 4°C; kemudian serum dikumpul dan disimpan pada suhu -70°C sehingga digunakan. Tahap IL-1β, IL-6, TNF-α, dan PGE2 dalam serum diukur menggunakan kit ELISA dari Sistem R&D (Minneapolis, MN, Amerika Syarikat) mengikut arahan pengilang.
2.4.5. Analisis RT-PCR Kuantitatif Masa Nyata
Jumlah RNA telah diekstrak daripada tisu sendi lutut menggunakan TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), ditranskripsi terbalik ke dalam cDNA dan PCR-amplified menggunakan kit TM One Step RT PCR dengan SYBR green (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, Amerika Syarikat). PCR kuantitatif masa nyata dilakukan menggunakan sistem PCR Masa Nyata Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Urutan primer dan jujukan probe ditunjukkan dalam Jadual1. Aliquot cDNA sampel dan jumlah cDNA GAPDH yang sama telah dikuatkan dengan campuran induk PCR Universal TaqMan® yang mengandungi polimerase DNA mengikut arahan pengilang (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Keadaan PCR adalah 2 minit pada 50°C, 10 minit pada 94°C, 15 saat pada 95°C, dan 1 minit pada 60°C untuk 40 kitaran. Kepekatan gen sasaran ditentukan menggunakan kaedah perbandingan Ct (nombor kitaran ambang pada titik silang antara plot amplifikasi dan ambang), mengikut arahan pengeluar.
